intronbio LPS提取試劑盒
LPS Extraction Kit
| intronbio 17141 | 100 rxn. |
產(chǎn)品信息
描述
能夠分離/純化存在于革蘭氏陰性細(xì)菌外壁中的LPS的產(chǎn)品
？LPS提取試劑盒是一種可以分離和純化革蘭氏陰性菌外壁中存在的LPS的產(chǎn)品。通常，革蘭氏陰性細(xì)菌除了在細(xì)胞包膜的外層中的磷脂和蛋白質(zhì)之外還具有稱(chēng)為脂多糖（LPS）的單獨(dú)結(jié)構(gòu)。這些LPS在細(xì)菌生長(zhǎng)和存活中起重要作用，并且已知其發(fā)揮許多作用，尤其是在宿主和寄生蟲(chóng)之間的相互作用中。此外，LPS被理解為與免疫應(yīng)答密切相關(guān)，例如當(dāng)施加膿毒性休克時(shí)通過(guò)分泌內(nèi)毒素引起外周血管塌陷，并且對(duì)于毒性病理生理反應(yīng)也是重要的。這種LPS對(duì)每種細(xì)菌具有不同的提取模式，這允許細(xì)菌的系統(tǒng)發(fā)育分離。如前面提到的，細(xì)菌內(nèi)毒素通常存在于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞的外壁上。它不會(huì)在細(xì)菌的生命過(guò)程中表達(dá)，但是當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)或死亡時(shí)，細(xì)胞壁被破壞并釋放到外面。天然內(nèi)毒素由LPS，蛋白質(zhì)和磷脂組成。它在自然狀態(tài)下非常穩(wěn)定，強(qiáng)熱，帶負(fù)電，并具有大的分子量（超過(guò)1,000,000道爾頓）。通常，用三氯藝酸，丁醇或EDTA提取蛋白質(zhì)以除去脂質(zhì)相關(guān)蛋白（LAP），并使用苯酚提取磷脂。通常，當(dāng)您嘗試提取LPS時(shí)，每細(xì)菌干重可獲得約1-4％的LPS。由于LPS萃取試劑盒基于苯酚水法，
應(yīng)用
套件內(nèi)容
| 內(nèi)容 | 17141（100 Rxn） |
|---|---|
| 裂解緩沖液 | 100毫升x 1 ea |
| 純化緩沖液 | 80毫升x 1 ea |
技術(shù)數(shù)據(jù)
LPS提取產(chǎn)率
| 應(yīng)變 | LPS產(chǎn)量（μg） | 蛋白質(zhì)污染* |
|---|---|---|
| 鼠傷寒沙門(mén)氏菌 | 200~400 | <0.2μg |
| 腸炎沙門(mén)氏菌 | 90~250 | <0.2μg |
| S. gallinarum | 150~450 | <0.2μg |
| 大腸桿菌（野生型） | 220~490 | <0.2μg |
| 大腸桿菌（O：055） | 260~510 | <0.2μg |
| 大腸桿菌（O：111） | 220~500 | <0.2μg |
| 大腸桿菌（O：1） | 180~380 | <0.2μg |
| 大腸桿菌（O：2） | 180~380 | <0.2μg |
使用LPS提取試劑盒從OD600的每個(gè)G（ - ）菌株中提取5個(gè)LPS，并使用Purpald測(cè)定法定量提取的LPS。結(jié)果，證實(shí)了上述提取效率。另一方面，使用我們的SMART™Micro BCA Assay Kit觀察蛋白質(zhì)的存在，確認(rèn)污染程度小于0.2μg。
通過(guò)從各種物種中提取的LPS給出條帶模式
泳道1：鼠傷寒沙門(mén)氏菌 泳道2：腸炎沙門(mén)氏菌
泳道3：大腸桿菌（O055） 泳道4：大腸桿菌（O111）
泳道5：S. gallinarium 泳道6：腸炎鏈球菌
泳道7：鼠傷寒沙門(mén)氏菌 泳道8 ：大腸桿菌（野生型）
泳道9：大腸桿菌（O111） 泳道10：大腸桿菌（O2）
？作為從各種革蘭氏陰性菌提取的LPS的SDS-PAGE后的銀染色的結(jié)果，根據(jù)以多聚體形式存在的LPS的特征和多聚體的數(shù)量觀察到梯型帶圖案，觀察到圖案與眾不同。
